SmartBatch+ firmy Life Canvas Technologies to zautomatyzowany, wysokoprzepustowy system do aktywnego clearingu tkanek i immunoznakowania całych organów, wykorzystujący technologie elektroforetyczne opracowane na bazie metod CLARITY, eFLASH oraz opatentowanego stochastic electrotransport (SE). Platforma integruje proces usuwania lipidów (delipidation), clearingu optycznego i aktywnego transportu przeciwciał w jednym urządzeniu, eliminując konieczność stosowania oddzielnych workflow dla każdego etapu przygotowania próbki.

System został zaprojektowany do szybkiego przygotowywania dużych, nienaruszonych biologicznie próbek do obrazowania 3D metodami light-sheet microscopy, konfokalnymi oraz obrazowania objętościowego. SmartBatch+ umożliwia jednoczesne przetwarzanie do 12 całych mózgów mysich lub próbek o porównywalnych rozmiarach, a także do 4 mózgów szczura w jednym cyklu eksperymentalnym. Producent podaje możliwość aktywnego clearingu całych mózgów myszy w około 24 godziny, podczas gdy całe mózgi szczura mogą zostać przygotowane w około 3–4 dni.

Kluczowym elementem platformy jest technologia Clear+, będąca rozwinięciem klasycznego CLARITY. W przeciwieństwie do wielu konwencjonalnych metod clearingu, takich jak iDISCO, CUBIC czy pasywne clearingi detergentowe, Clear+ pozwala uzyskać bardzo wysoką przezroczystość optyczną przy jednoczesnym zachowaniu architektury tkankowej bez ekspansji lub kurczenia próbki. Producent podkreśla, że metoda zachowuje integralność mechaniczną, strukturę molekularną, sygnał białek fluorescencyjnych oraz antygenowość podczas całego procesu przygotowania.

SmartBatch+ wykorzystuje aktywny elektroforetyczny transport przeciwciał i barwników przez tkankę, dzięki czemu znakowanie dużych próbek jest znacznie bardziej jednorodne niż w metodach pasywnych. System minimalizuje efekt powierzchniowego przesycenia przeciwciałami oraz umożliwia penetrację głęboko do wnętrza całych organów. Nowa platforma Radiant, instalowana fabrycznie w nowych systemach, dodatkowo poprawia efektywność znakowania trudnych targetów, takich jak tkanka serca, mięśnie szkieletowe, tkanki o wysokiej ekspresji antygenów czy duże próbki pochodzące od szczura lub marmozety.

System został zoptymalizowany pod kątem redukcji kosztów i czasu pracy laboratoryjnej. Producent deklaruje zużycie jedynie 4–20 µg przeciwciała na target dla próbki wielkości całego mózgu myszy, co stanowi nawet rząd wielkości mniej niż w klasycznych metodach pasywnego znakowania. Dodatkowo całkowity czas manualnej obsługi wynosi mniej niż 12 minut hands-on time na próbkę.

Cechy techniczne

• Aktywny elektroforetyczny clearing i immunoznakowanie
• Integracja clearingu i znakowania w jednym urządzeniu
• Technologie Clear+, eFLASH oraz stochastic electrotransport
• Batch processing do 12 mózgów myszy jednocześnie
• Obsługa do 4 mózgów szczura równolegle
• Pełny clearing mózgu myszy w około 24 h
• Aktywne immunoznakowanie całych organów w około 2 dni
• Zachowanie morfologii bez ekspansji i kurczenia próbki
• Zachowanie sygnału białek fluorescencyjnych
• Zachowanie antygenowości i integralności strukturalnej
• Jednorodne znakowanie bez powierzchniowego przesycenia
• Minimalne zużycie przeciwciał
• Kompatybilność z dużymi próbkami i whole-organ imaging
• Wsparcie dla obrazowania light-sheet microscopy
• Możliwość pracy z tkankami mózgu, serca, mięśni i innych organów
• Fabryczna kompatybilność z platformą Radiant
• Niewielki footprint laboratoryjny

Ulepszone znakowanie trudnych celów

Radiant to nowy system buforów do znakowania pierwotnego, opracowany w celu poprawy skuteczności i dokładności wiązania przeciwciał w przypadku celów, które nie są dobrze pokrywane przez standardowe metody. Dzięki modulowaniu powinowactwa wiązania, Radiant pozwala niektórym przeciwciałom na bardziej równomierny rozkład w próbce, zapewniając lepsze pokrycie w takich przypadkach jak:

• Cele występujące w dużych ilościach: Idealny do znakowania białek takich jak lamina B1.
• Złożone narządy: Równomierne znakowanie w tkankach takich jak mięśnie szkieletowe i serce.
• Duże tkanki: w pełni penetruje tkanki większych gatunków, takich jak szczur i marmozetka.
• Cele o dużej gęstości: idealny do struktur o gęstym znakowaniu w zastosowaniach takich jak śledzenie wirusów.

Spójne dane histologiczne

System SmartBatch+ pozwala na aktywne oczyszczanie i znakowanie nawet 12 całych mózgów myszy lub próbek o porównywalnej wielkości w zaledwie jeden dzień, a także 2 całych mózgów szczurów w ciągu zaledwie 3–4 dni! Zapewnia to niezrównaną spójność wyników dla wielu grup badanych. Niewielkie wymiary urządzenia pozwalają również na swobodne ustawienie wielu egzemplarzy.

Wysoka jakość integralności próbek do obrazowania 3D

SmartBatch+ w połączeniu z konserwacją tkanek SHIELD chroni sygnał białka fluorescencyjnego, antygenowość oraz architekturę molekularną i fizyczną na wszystkich etapach przetwarzania tkanek. Clear+ jest obecnie jedyną techniką oczyszczania tkanek, która zachowuje morfologię próbek. Gwarantuje to, że Państwa próbki będą generować obrazy bogate w informacje.