MegaSPIM – mikroskop typu Light Sheet do preparatów o wymiarach do 200 mm x 200 mm

Wysokorozdzielcza mikroskopia arkusza światła dla szerokiego zakresu zastosowań

MegaSPIM to niezwykle elastyczny system obrazowania, stworzony do szybkiego pozyskiwania danych o wysokiej rozdzielczości z różnych typów tkanek, takich jak:

• cienkie skrawki,
• grube klarowane skrawki narządów ludzkich i naczelnych,
• pełen przekrój małych klarowanych preparatów, takich jak całe narządy gryzoni czy organoidy

Dla wszystkich tych typów próbek oraz wielu innych dostępne są dedykowane rozwiązania montażowe.

Po zakończeniu akwizycji danych zoptymalizowany pipeline do post-processingu umożliwia:

• usuwanie artefaktów (destriping),
• korekcja zniekształceń (deskewing),
• stitching dużych zbiorów danych,

Dzięki temu można łatwo tworzyć kompletne zestawy obrazów 3D gotowe do dalszej analizy.

Wysokoprzepustowe obrazowanie objętościowe zaprojektowane z myślą o szybkości i wszechstronności

System umożliwia szybkie skanowanie tkanek oraz przekształcanie surowych obrazów w kompletne stosy 3D gotowe do wizualizacji i analizy.

MegaSPIM pozwala wydajnie generować wysokiej jakości dane zarówno z wielu próbek jednocześnie, jak i z dużych preparatów biologicznych.

Obrazowanie skrawka ludzkiego mózgu o grubości 1 mm może zostać ukończone w zaledwie 8 godzin przy użyciu obiektywu 1.8× i pojedynczej kamery.

Szczegółowe dane 3D — od preparatów ludzkich po cienkie skrawki

MegaSPIM umożliwia uzyskiwanie szczegółowych danych przestrzennych z bardzo różnych typów próbek biologicznych.

Przykładowe zastosowania obejmują kolejno (opis oryginalny):

• TIGRE-MORF mouse brain, expressed via AAVI-Cre, imaged with MegaSPIM at 9X magnification. Shown: 200um Maximum Intensity Projection from a 1mm thick coronal section. Sample courtesy of Hongwei Dong Lab at UCLA.
• E14.5 mouse embryo brains labeled for cell nuclei via YoPro1 (cyan), Olig2 (yellow), and C-Fos (magenta). Courtesy of Dr. Claire-Marie Vacher, Columbia University. Imaged on MegaSPIM at 3.6X magnification, 30 minutes per sample (3 channels).
• Syto16 (cyan), CD31 (yellow), + Iba-1 (magenta) in 2mm-thick section of pig brain, sliced with Megatome and imaged with MegaSPIM at 1.8X (left) and 15X (right) magnifications.
• Iba-1 in 100µm-thick uncleared section of mouse brain, sliced with Megatome and imaged with MegaSPIM at 15X magnification.

System sprawdza się zarówno w obrazowaniu dużych preparatów, jak i cienkich sekcji wymagających wysokiej rozdzielczości.

Oświetlenie i detekcja arkusza światła

MegaSPIM wykorzystuje opatentowaną technologię axial sweeping, która umożliwia uzyskanie jednolitej rozdzielczości osiowej w całym polu widzenia bez potrzeby dekonwolucji.

Obiektywy o dużej odległości roboczej, ustawione pod kątem 45° względem płaszczyzny próbki, pozwalają obrazować próbki o wymiarach bocznych ograniczonych jedynie zakresem ruchu stolika.

Algorytm (deskewingu) automatycznie przekształca nachylone stosy obrazów do standardowego układu XY, gotowego do stitchingu w kompletne wolumeny XYZ przeznaczone do wizualizacji i analizy.